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技術(shù)文章

運(yùn)用“磁珠法”檢測(cè)樣品的核酸提取儀

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  隨著核酸提取在分子診斷、法醫(yī)偵測(cè)、臨床檢查、科研實(shí)驗(yàn)等諸多方面的廣泛應(yīng)用,對(duì)核酸提取技術(shù)也提出了新的要求。核酸提取儀是一種應(yīng)用配套的核酸提取試劑來(lái)自動(dòng)完成樣本核酸快速提取工作的儀器。核酸提取作為分子生物學(xué)的基本方法,能否快速提取出高質(zhì)量的核酸是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵。提取儀運(yùn)用磁珠法,可以對(duì)不同的生物樣品的核酸進(jìn)行富集和純化,儀器全自動(dòng)運(yùn)行,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,純化效率高,紫外消毒燈與多選的溫控設(shè)計(jì)保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用于疾控、輸血安全、食品環(huán)境監(jiān)控等研究。
  磁珠法的原理是什么?
  裂解:在裂解緩沖液中加入樣本和蛋白酶,使核酸裂解釋放。
  洗滌:加入磁珠,充分混合使核酸吸附,反復(fù)清洗,去除雜質(zhì)。
  洗脫:把磁珠轉(zhuǎn)移到洗脫緩沖液中充分混合,核酸脫落。
  磁珠法有什么特別之處?核酸自動(dòng)提取儀是以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低pH值下吸附核酸,在低鹽高pH值下與核酸分離的特性,再通過(guò)移動(dòng)磁珠或轉(zhuǎn)移液體來(lái)實(shí)現(xiàn)核酸的整個(gè)提取純化過(guò)程。
  根據(jù)移液特點(diǎn)的不同,磁珠法核酸自動(dòng)提取儀可分為抽吸式(也叫移液式)和磁棒式兩種類(lèi)型。前者因提取時(shí)間較長(zhǎng),且機(jī)械臂移液的設(shè)計(jì)造成設(shè)備體積較大、較高等因素,無(wú)法在商業(yè)上迅速推廣。目前市場(chǎng)上使用較多的大部分是基于磁棒式的磁珠法核酸提取儀。
  

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